牛奶是最古老的天然飲料之一,被譽(yù)為“白色血液”,對(duì)人體的重要性可想而知。而組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸有20種,其中有8種是人體本身不能合成的(嬰兒為9種,比成人多的是組氨酸),這些氨基酸稱(chēng)為必需氨基酸。我們進(jìn)食的蛋白質(zhì)中如果包含了所有的必需氨基酸,這種蛋白質(zhì)便叫作全蛋白。牛奶中的蛋白質(zhì)便是全蛋白。
今天,我們通過(guò)實(shí)驗(yàn)介紹純牛奶及酸奶的蛋白質(zhì)測(cè)定方法。
1.實(shí)驗(yàn)部分
1.1儀器
N310自動(dòng)凱氏定氮儀(格丹納)
DS-360-42H高溫石墨消解儀(格丹納)
1.2試劑與耗材 鹽酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,標(biāo)準(zhǔn)滴定液。
硼酸溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù) 2% 。
氫氧化鈉溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù) 40% 。
溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑:將溴甲酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 體積比臨時(shí)混合搖勻備用。
實(shí)驗(yàn)中涉及到的試劑,均為優(yōu)級(jí)純或分析純;
實(shí)驗(yàn)用水為無(wú)氨蒸餾水。
催化劑片: 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片
1.3實(shí)驗(yàn)過(guò)程
1.3.1取樣 準(zhǔn)確稱(chēng)量2-3g 的樣品(精確至0.1mg ),加催化劑一片(或硫酸鉀5g 與硫酸銅0.5g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL。
1.3.2石墨消解 利用DS-360-42H高溫石墨消解儀進(jìn)行消解,將消解管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表:
消解完,取下消解管并冷卻。
1.3.3上機(jī)測(cè)試 待消解管內(nèi)溶液冷卻至室溫后,將消解管放置于N310自動(dòng)凱氏定氮儀上,開(kāi)始蒸餾滴定。定氮儀設(shè)置程序如下:
1.3.4儀器自動(dòng)滴定并給出計(jì)算結(jié)果。
2.結(jié)果與討論
采用多孔石墨消解儀可以快速大批量對(duì)樣品進(jìn)行消解,比電熱板消解速度跟效率都要大大提高,回收率也得到保障,使用凱氏定氮儀測(cè)試奶制品中蛋白質(zhì)含量,結(jié)果準(zhǔn)確,平行性良好。